Medmol  
Fibao Una perspectiva molecular en medicina
TECNICAS
Ratones transgénicos y ratones knockout
Tratamiento
Etiopatogenia
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Fecha de Publicación: 8-10-2007 Última actualización : 4-12-2007
Resumen
Un ratón transgénico es un ratón al que se le ha modificado su ADN y por tanto su información genética. Estas modificaciones consisten en la introducción de un gen nuevo o en la eliminación de un gen propio. La obtención de ratones transgénicos facilita el estudio de la función básica de un gen determinado. A los ratones en los que la expresión de un gen propio se elimina por completo se les denomina ratones knockout.
Concepto
En esta animación se describe cómo se obtiene un ratón transgénico ý un ratón knockout
Los ratones son utilizados como modelo en experimentos de laboratorio. Un ratón transgénico es un ratón al que se le ha modificado su ADN y por tanto su información genética. Frecuentemente estas modificaciones consisten en la introducción o en la eliminación de un gen (fragmento de ADN que codifica la información para producir una proteína). Mientras que insertando un gen de otro organismo podemos obtener ratones que producen proteínas que antes no producían, eliminando un gen podemos averiguar qué función desempeñaba la proteína que codificaba. Existen diferentes métodos para la obtención de un ratón transgénico. Una de las técnicas más conocidas en el campo de la biomedicina y en la biología del desarrollo es la microinyección. Un gen de un organismo puede insertarse en un vector, que sirve como vehículo de transporte, y ser introducido en una bacteria. Sucesivas divisiones de la bacteria darán como resultado una población (un clon) que porta el vector con el gen que hemos introducido. Existen métodos sencillos de extracción de estos vectores. El gen puede ser liberado de nuevo de estos vectores empleando enzimas de restricción que catalizan el corte del ADN en puntos con secuencias específicas. Obtenemos de este modo un gran número de copias del gen que queremos insertar en el ratón. El ADN lineal que incluye el gen a estudiar es entonces inyectado en uno de los pronúcleos (generalmente el masculino, por ser de mayor tamaño) de un ovocito de ratón fecundado, en una fase anterior a la fusión pronuclear. El paso posterior es la fusión de los pronúcleos. El fragmento de ADN inyectado puede integrarse al azar en el ADN del ratón. El desarrollo del embrión conducirá a la obtención del ratón transgénico en aquellos casos en los que se den las condiciones adecuadas. La inserción debe producirse en un fragmento de ADN del ratón que no impida la expresión del gen introducido. Por otro lado la inserción del gen a estudiar no debe alterar la expresión de genes del ratón que puedan enmascarar el efecto de la inserción. También es fundamental que la inserción del gen no tenga un efecto letal en el ratón. Una estrategia similar pero orientada a bloquear la expresión de un gen concreto de forma específica se utiliza para obtener ratones knockout que permiten estudiar el efecto que produce la eliminación de la expresión de un gen.